細(xì)胞基本屬性:
種屬來(lái)源:大鼠
組織來(lái)源:視網(wǎng)膜
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)條件氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%胰蛋bai酶
產(chǎn)品貨期:6周左右
運(yùn)輸方式:T25培養(yǎng)瓶/順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制:僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類(lèi)疾病的治療產(chǎn)品使用
商品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 大鼠原代視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞 | 貨號(hào) | EY-XY3508 |
英文名稱(chēng) | Rat Retinal Microvascular Endothelial Cells | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣
培養(yǎng)基:大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基
傳代比例:傳代建議1:2傳代,1:2傳代是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或2個(gè)6cm皿
背景介紹:
大鼠原代視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞采用膠原酶-中性蛋bai酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、最后通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)。視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺(jué)層組成,兩層間在病理情況下可分開(kāi),稱(chēng)為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連,由色素上皮細(xì)胞組成,它們具有支持和營(yíng)養(yǎng)光感受器細(xì)胞、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層,由外向內(nèi)分別為:色素上皮層、視錐、視桿細(xì)胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺(jué)層是由三個(gè)神經(jīng)元組成。神經(jīng)元是視細(xì)胞層,專(zhuān)司感光,它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上,而視錐細(xì)胞則在中心凹處最多。第二層叫雙節(jié)細(xì)胞,約有10到數(shù)百個(gè)視細(xì)胞通過(guò)雙節(jié)細(xì)胞與一個(gè)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系,負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細(xì)胞層,專(zhuān)管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),它貼于眼球的后壁部,傳遞來(lái)自視網(wǎng)膜感受器沖動(dòng)的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),其分辨能力。它是組成血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞,它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對(duì)維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用,在視網(wǎng)膜血管疾病的發(fā)病機(jī)制中有重要病理生理學(xué)意義。由于從不同的組織和器官獲得的內(nèi)皮細(xì)胞具有不同的特性,在腦和視網(wǎng)膜中,這些內(nèi)皮細(xì)胞具有內(nèi)屏障的功能,在調(diào)節(jié)血管生理狀態(tài),釋放血管活性物質(zhì)以及新生血管的形成中發(fā)揮著重要作用,體外分離培養(yǎng)RCEC對(duì)研究視網(wǎng)膜血管性疾病發(fā)生發(fā)展的病理生理機(jī)制以及疾病的早期防治具有重要臨床意義。糖尿病性視網(wǎng)膜病變、年齡相關(guān)性黃斑變性等視網(wǎng)膜疾病均與視網(wǎng)膜血管病理性改變密切相關(guān)。隨著對(duì)視網(wǎng)膜血管性疾病的研究深入,發(fā)現(xiàn)視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞是該病變的關(guān)鍵細(xì)胞。通過(guò)體外分離培養(yǎng)原代視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞獲得大量純度高的內(nèi)皮細(xì)胞,可為視網(wǎng)膜血管性疾病研究提供可靠的體外模型。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開(kāi)瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀(guān)拍一張照片,觀(guān)察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀(guān)察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷(xiāo)售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶(hù)收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶(hù)需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶(hù)提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
5.客戶(hù)在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,有任何可以咨詢(xún)我們?cè)诰€(xiàn)客服。
原代細(xì)胞和傳代細(xì)胞培養(yǎng)有含義、培養(yǎng)過(guò)程、培養(yǎng)結(jié)果和應(yīng)用四個(gè)方面區(qū)別:
一、含義不同
原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取組織或器官的一部分進(jìn)行培養(yǎng),也稱(chēng)初代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)是將培養(yǎng)物放置在體外生長(zhǎng)環(huán)境中持續(xù)培養(yǎng),中途不分割培養(yǎng)物的培養(yǎng)過(guò)程。
傳代培養(yǎng)是指需要將培養(yǎng)物分割成小的部分,重新接種到另外的培養(yǎng)器皿(瓶)內(nèi),再進(jìn)行培養(yǎng)的過(guò)程。
二、培養(yǎng)過(guò)程不同
原代培養(yǎng)將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出離散成單個(gè)細(xì)胞(常用,置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞得以生存、生長(zhǎng)和繁殖。培養(yǎng)過(guò)程相對(duì)復(fù)雜,培養(yǎng)條件要求也高,在所有的操作過(guò)程中,都必須保持培養(yǎng)物及生長(zhǎng)環(huán)境的無(wú)菌。
傳代培養(yǎng)是在原代細(xì)胞基礎(chǔ)上通過(guò)等物質(zhì)消化后繼續(xù)用于細(xì)胞培養(yǎng)的細(xì)胞,它與原代細(xì)胞具有相同核型。這類(lèi)細(xì)胞在體外可以無(wú)限制分裂。一般普通培養(yǎng)條件下都容易生存,傳代細(xì)胞容易增殖。但也要注意無(wú)菌操作并防止細(xì)胞之間的交叉污染,所有操作要盡量靠近酒精燈火焰。每次最好只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作。
三、培養(yǎng)結(jié)果不同
原代培養(yǎng)細(xì)胞會(huì)分裂。原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細(xì)胞的生長(zhǎng)就會(huì)出現(xiàn)停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡。細(xì)胞接種后一般幾小時(shí)內(nèi)就能貼壁,并開(kāi)始生長(zhǎng),如接種的細(xì)胞密度適宜,5天到一周即可形成單層。
傳代培養(yǎng)一般傳到40到50代。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2到4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。
四、應(yīng)用不同
原代細(xì)胞培養(yǎng)為研究生物體細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝、繁殖提供有力的手段,同時(shí)也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。利用此方法還可直接服務(wù)于臨床實(shí)踐。例如,用從手術(shù)中切除的腫瘤細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng),然后用該培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行抗癌藥物的篩選,來(lái)幫助選擇化療方案。
傳代培養(yǎng)主要應(yīng)用在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,如口腔醫(yī)學(xué)領(lǐng)域重新構(gòu)建結(jié)構(gòu)復(fù)雜的牙根,還有改良羊水細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),可多次獲得有效地細(xì)胞克隆,大大提高培養(yǎng)成功率,增加了可分析核型數(shù)量,提高了產(chǎn)前診斷工作的質(zhì)量和效益。
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