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產(chǎn)品展示   Products原代細(xì)胞>>人原代細(xì)胞>>人原代心肌成纖維原代細(xì)胞
 
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產(chǎn)品名稱:
人原代心肌成纖維原代細(xì)胞
產(chǎn)品型號:
產(chǎn)品報價:
2600
產(chǎn)品特點(diǎn):
人原代心肌成纖維原代細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:Hs 815.Pl人胎盤細(xì)胞(有限細(xì)胞系)Hs 870.T骨肉瘤Hs 888.T骨肉瘤Hs 934.T黑素瘤HS-27A人骨髓基質(zhì)成纖維細(xì)胞Hs294T細(xì)胞Hs362T細(xì)胞HS-5 細(xì)胞專用培養(yǎng)基Hs578bst (STR)人正常乳腺細(xì)胞HS578T 細(xì)胞專用培養(yǎng)基
  人原代心肌成纖維原代細(xì)胞的詳細(xì)資料:

人原代心肌成纖維原代細(xì)胞

商品屬性:

人原代心肌成纖維原代細(xì)胞

規(guī)格

5x105cells/T25或1mL凍存管

貨號

EY-XY3274

種屬來源

組織來源

心臟組織

生長特性

貼壁生長

形態(tài)特征

成纖維細(xì)胞樣

形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
培養(yǎng)基:人心肌成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基

培養(yǎng)環(huán)境:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

傳代特征:可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

 

人原代心肌成纖維原代細(xì)胞


細(xì)胞基本屬性:

人原代心肌成纖維原代細(xì)胞

種屬來源

組織來源:心臟組織心臟組織

生長特性:貼壁生長

產(chǎn)品規(guī)格5x105cells/T251mL凍存管
換液頻率2-3天換液一次

消化液0.25%胰蛋bai

產(chǎn)品貨期7-8周左右

運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)

供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用

背景介紹:人心肌成纖維細(xì)胞采用膠原酶-胰蛋bai酶聯(lián)合消化結(jié)合差速貼壁法制備而來,人心肌成纖維細(xì)胞分離自心臟組織;心臟由心肌細(xì)胞和非心肌細(xì)胞組成,非心肌細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)的70%,其中90%以上的非心肌細(xì)胞由心肌成纖維細(xì)胞組成。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的心肌成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。近年來,人們逐漸了解到非心肌細(xì)胞不僅對心肌細(xì)胞具有結(jié)構(gòu)上的支持、保護(hù)作用,而且還具有自分泌和旁分泌功能,影響心肌細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和生理功能;心肌成纖維細(xì)胞主要功能為對心肌細(xì)胞起結(jié)構(gòu)支持作用并負(fù)責(zé)細(xì)胞基質(zhì)外的合成,當(dāng)心肌損傷時能產(chǎn)生旁分泌生長因子。心肌成纖維細(xì)胞是心臟結(jié)締組織中最常見的細(xì)胞,可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維及有機(jī)基質(zhì),并且在外傷等因素刺激下,部分纖維細(xì)胞可重新轉(zhuǎn)變?yōu)橛字傻某衫w維細(xì)胞,其功能活動也得以恢復(fù),參與組織損傷后的修復(fù)。因此,對心肌成纖維細(xì)胞的生理學(xué)研究成為現(xiàn)代心血管領(lǐng)域研究的一個重點(diǎn)。


人原代心肌成纖維原代細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)操作:

人原代心肌成纖維原代細(xì)胞
收貨處理取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)

傳代密度細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)

傳代代數(shù)可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿

傳代方法:

1.吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;

3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);

4.待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。

原代細(xì)胞培養(yǎng)的主要步驟包括:

人原代心肌成纖維原代細(xì)胞
?一、剝離組織,去除外膜、結(jié)締組織等?:將組織從動物體中取出,并去除可能存在的外膜或結(jié)締組織等雜質(zhì)。

二、?洗滌后將組織剪成1mm左右的小塊?:使用生理鹽水或其他適當(dāng)?shù)木彌_液洗滌組織,然后將其剪成約1mm大小的小塊。

三、?用0.1%~0.2%的消化?:將剪碎的組織塊加入含有0.1%~0.2%的緩沖液中,進(jìn)行消化。消化時間可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)需求選擇熱消化(37℃)或冷消化(4℃),熱消化時間短,冷消化時間長但條件更溫和。

?四、吹打分散后,過濾、計(jì)數(shù)?:將消化后的細(xì)胞吹打到一個離心管中,然后過濾、計(jì)數(shù)。

五、?按30萬/毫升分瓶培養(yǎng)?:將計(jì)數(shù)后的細(xì)胞按30萬/毫升的濃度分瓶培養(yǎng)。

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