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產(chǎn)品名稱 | 乳腺癌細胞;BC-019 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63670 |
細胞名稱 人乳腺癌細胞;BC-019
形態(tài)特性: 上皮樣細胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: BC-019乳腺癌細胞由中國人種乳腺癌組織經(jīng)培養(yǎng)選擇獲得,于2007年建立鑒定,是乳腺癌基礎(chǔ)研究和臨床研究的材料。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;50u/ml試劑胰島素
傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況: C27
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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產(chǎn)品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。
Sophoridine
CAS No.:6882-68-4
中文名:槐定
分子式:C15H24N2O
格列喹;Gliquidone 訂購|咨詢 神經(jīng)肽FF(NPFF) 規(guī)格: 20mg
反式茴香腦;transAnethole 訂購|咨詢 神經(jīng)肽S(NPS) 規(guī)格: 0.1ml
γ倒捻子素;γ Mangostin 訂購|咨詢 神經(jīng)肽S(NPS) 規(guī)格: 20mg
靛藍;Indigo 訂購|咨詢 神經(jīng)肽S(NPS) 規(guī)格: 20mg
常春藤苷D;Hederacoside D 訂購|咨詢 神經(jīng)肽S受體(NPSR) 規(guī)格: 20mg
茶 ;Theophylline 訂購|咨詢 神經(jīng)肽VF(NPVF) 規(guī)格: 100mg
并黃素;alphaNaphthofl 訂購|咨詢 神經(jīng)肽W(NPW) 規(guī)格: 20mg
DL薄荷;Menthol 訂購|咨詢 神經(jīng)肽Y(NPY) 規(guī)格: 20mg
阿馬;Raubasine 訂購|咨詢 神經(jīng)肽Y(NPY) 規(guī)格: 100mg
環(huán)星;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 神經(jīng)肽Y(NPY) 規(guī)格: 0.1g
茚;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 神經(jīng)肽Y(NPY) 規(guī)格: 0.1g
炔酰草;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 神經(jīng)肽Y受體Y1(NPY1R) 規(guī)格: 0.1g
2;4D;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 神經(jīng)肽Y受體Y1(NPY1R) 規(guī)格: 0.1g
基立枯;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 神經(jīng)肽Y受體Y1(NPY1R) 規(guī)格: 0.1g
繁福松;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 神經(jīng)肽Y受體Y2(NPY2R) 規(guī)格: 0.1g
右旋炔呋;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 神經(jīng)肽Y受體Y2(NPY2R) 規(guī)格: 0.1g
噻嗪;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 神經(jīng)肽Y受體Y2(NPY2R) 規(guī)格: 0.1g
唑;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 神經(jīng)肽Y受體Y5(NPY5R) 規(guī)格: 0.25g
PLRP1/PNLIPRP1 胰脂肪酶相關(guān)蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Tadalafil
BMP15 骨形態(tài)發(fā)生蛋白15抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml 17AAG
BCAT1 胞漿支鏈基轉(zhuǎn)酶抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml 17AAG
BMP5 骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Terazosin HCl
Hepatic lipase 肝脂酶抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Testosterone
GABA Transporter 1/GAT1 γ基運載蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Testosterone
PAPPA 相關(guān)血漿蛋白A抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Tetracaine HCl
PPT1 棕櫚酰蛋白酯酶1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Tetracaine HCl
硼砂 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Sodiumtetraboratedecahydrate 含量:高純,99%
硼砂緩沖液 進口、國產(chǎn) 英文名稱:BoraxHydrochloricacidBuffersolution 含量:AR
硼鉀 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Potassiumtetraboratetetrahydrate 含量:GR,99%
硼氫銨 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Ammoniumborate 含量:AR,96%
硼三丁酯 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Tributylborate 含量:BR,99%
膨潤土 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Bentonite 含量:BR,99%
皮膚組織切片固定劑 進口、國產(chǎn) 英文名稱:HistoChoice®DermatologyFixative 含量:3N
皮脂二丁酯 進口、國產(chǎn) 英文名稱:DBS 含量:AR,96%
皮脂二甲酯 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Dimethylsebacate 含量:CP,98%
皮脂二正辛酯 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Dinoctylsebacate 含量:AR,98%
乳腺癌細胞;BC-0197%羊血瓊脂基礎(chǔ)規(guī)格:250g用途:用于李斯特氏菌的溶血試驗
緩沖蛋白胨水(BPW)規(guī)格:300ml/袋*10用途:用于阪崎桿菌前增菌培養(yǎng) (GB標準)
3%NaCl賴氨脫羧酶規(guī)格:20支詳情介紹
BCYE-Cys瓊脂基礎(chǔ)規(guī)格:100g用途:用于軍團菌的選擇性分離培養(yǎng)(ISO標準)
mCPC 培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于弧菌分離培養(yǎng)(FDA標準)
KF鏈球菌肉湯規(guī)格:1%TT溶液用途:0.01g每支含量