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產(chǎn)品展示   ProductsATCC細胞>>轉(zhuǎn)化細胞>>293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP
 
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產(chǎn)品名稱:
293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP
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  293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP的詳細資料:

公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學(xué)研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:

產(chǎn)品名稱

生長特性

貨號

293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP

貼壁生長

EY-X63448

細胞名稱  293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP
形態(tài)特性: 上皮樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性:

培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

傳代方法: 1:2~1:3傳代。

傳代情況: C3

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 培養(yǎng)法(-)
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
rrIL-18, CF (25 UG)細胞名稱: 抗人IgM小鼠雜交瘤細胞;3C6 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-18 (25 UG)細胞名稱: 抗赭曲霉素A雜交瘤細胞;Z01 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-17F, CF (25 UG)細胞名稱: 抗CEA小鼠雜交瘤;C1 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-17F (25 UG)細胞名稱: 抗B1小鼠雜交瘤細胞;B01 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-13, CF (25 UG)細胞名稱: 抗肝細胞生長因子(HGF)雜交瘤細胞;HGF1 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-13 (25 UG)細胞名稱: 抗肝細胞生長因子(HGF)雜交瘤細胞;HGF2 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-12, CF (10 UG)細胞名稱: 抗CEA小鼠雜交瘤細胞;C2 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-12 (10 UG)細胞名稱: 抗抗人垂體泌乳素雜交瘤細胞;PRL2 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-10, CF (5 UG)細胞名稱: 抗抗人垂體泌乳素雜交瘤細胞;PRL1 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-10, CF (25 UG)細胞名稱: 抗精核蛋白;HP1 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-10 (Cys167Tyr), CF (10 UG)細胞名稱: 抗精核蛋白;HP2 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-10 (Cys167Tyr) (10 UG)細胞名稱: 抗精核蛋白;HP3 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-10 (5 UG)細胞名稱: 抗小鼠雜交瘤細胞;D7 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-10 (25 UG)細胞名稱: 抗孕雜交瘤細胞;P01 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-1 Rrp2/Fc, CF (100 UG)細胞名稱: 抗睪小鼠雜交瘤細胞;T01 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-1 RI/Fc, CF (100 UG)細胞名稱: 抗α雜交瘤細胞;H80X RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP人組織蛋白酶D(cath-D)ELISA試劑盒LAC/LAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人組織多肽特異性抗原(TPS)ELISA試劑盒LAMELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物(GTE-AGE)ELISA試劑盒LAPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人不對稱二甲基精氨(ADMA)ELISA試劑盒LATELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人補體片斷5b(C5b)ELISA試劑盒LATELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人補體片斷4b(C4b)ELISA試劑盒LATSELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人補體片斷3b(C3b)ELISA試劑盒LBPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人多形核白細胞彈性蛋白酶(PMNElastase)ELISA試劑盒LBPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 293來源病毒 包裝細胞 ΦA-GP
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