產(chǎn)品及特點(diǎn):
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,使每個(gè)循環(huán)變得“可見(jiàn)”。本產(chǎn)品就是以探針?lè)晒舛?RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開(kāi)發(fā)的專(zhuān)門(mén)檢測(cè)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
布氏旋毛蟲(chóng)探針?lè)≒CR熒光定量試劑盒 | Trichinella britovi | EY00P9441 |
運(yùn)輸及保存: 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為12個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類(lèi):熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)。
客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱(chēng)即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針?lè)ā?/font>
可進(jìn)行相對(duì),定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測(cè)等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)
溶解曲線(xiàn) ·擴(kuò)增曲線(xiàn)
完整的實(shí)驗(yàn)過(guò)程、試劑、儀器及分析報(bào)告
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使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供無(wú)傳染性的 DNA 段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個(gè)樣品,設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是 NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL陽(yáng)性對(duì)照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購(gòu)本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR 管,其中N+2個(gè)用于上步得到的 N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照(用水做模板),6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照(用第4號(hào)管的陽(yáng)性對(duì)照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)
5A/5B Peptide (1) TMB顯色液A液Human ADARB2-AS1 (Putative uncharacterized protein ADARB2-AS1) ELISA KIT
5A/5B Peptide (3)TMB顯色液B液 Human PC (Pyruvate carboxylase, mitochondrial) ELISA KIT
[β-Ala70]-C3a (70-77)D-α-酚醋酸酯 96%Human QRFPR (Pyroglutamylated RFamide peptide receptor) ELISA KIT
[β-Ala8]-神經(jīng)激肽A (4-10)5-溴-4-氯-3-吲哚神經(jīng)氨酸 97%Human PYCARD (Apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD) ELISA KIT
[Ac-Cys4,DPhe7,Cys10]a-促黑激素(4-13)酰烯酸, GR,>99.5%(GC)Human ECM29 (Proteasome-associated protein ECM29 homolog) ELISA KIT
[Ala1]-蛋白酶激活受體-4 (1-6) 酰 (小鼠)苯乙酮 GCS,≥99.5% (GC)Human PROCA1 (Protein PROCA1) ELISA KIT
[Ala1]-蛋白酶激活受體-4 (1-6) (小鼠)苯乙酮 AR,≥98.0% (GC)Human BORA (Protein aurora borealis) ELISA KIT
[Ala2](蛋氨酸)-腦啡肽酰苯乙酮 CP,98%Human PPP1R13B (Apoptosis-stimulating of p53 protein 1) ELISA KIT
[Ala3,11,18, Nle7] 人內(nèi)皮素-1苯乙酮 GR,≥99.0% (GC)Human POMK (Protein O-mannose kinase) ELISA KIT
[Ala4] -髓鞘堿性蛋白 (1 - 11)異佛爾酮二 99%Human PKN1 (Serine/threonine-protein kinase N1) ELISA KIT
[Ala5, β-Ala8]-神經(jīng)激肽A (4-10)乙酰乙酸基烯酸乙酯 95%Human PPP2R4(Serine/threonine-protein phosphatase 2A activator) ELISA Kit
[Ala8] - Humanin, [Ala8] - HN,Shna烯酰 AR,99.0%Human METRN(Meteorin) ELISA Kit
[Ala9] Autocamtide 2;Autocamtide-2-Related Inhibitory Peptide己二酸二酰肼 98%Human PAFAH1B1 (Plaet-activating factor acetylhydrolase IB subunit alpha) ELISA KIT
[Ala9,10, Lys11,12] 糖原合成酶 (1-12)正丁 AR,98.5%Human PSKH1 (Serine/threonine-protein kinase H1) ELISA KIT
[Ala11,22,28]-血管活性腸肽 (人,牛,豬,大鼠)1,4-丁二 99%Human LAMA3(Laminin subunit alpha-3) ELISA Kit
布氏旋毛蟲(chóng)探針?lè)?/font>PCR熒光定量試劑盒光導(dǎo)蛋白(PDC)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)硫酸根離子(SO42-)標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,介質(zhì):水) 質(zhì)量規(guī)格:商品級(jí)
網(wǎng)蛋白(PLEC)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)硫酸根離子(SO42-)標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑:水) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
磷脂酰肌蛋白聚糖6(GPC6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)硫酸根離子(SO42-)標(biāo)準(zhǔn)溶液(100 ug/ml) 質(zhì)量規(guī)格:BS
鈣調(diào)素(RGN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)釤標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
核糖體結(jié)合糖蛋白Ⅰ(RPN1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)溶液(100mg/L,溶劑:甲吸收液) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Rhotekin蛋白(RTKN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)(K,Na)多元素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(混標(biāo))(100μg/ml) 質(zhì)量規(guī)格:>96%,BC
根蛋白(RDX)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)(As,Sb,Li,Mn,Mo,Ni,P,K,Sc,Na,S)多元素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(混標(biāo))(100μg/ml) 質(zhì)量規(guī)格:BC
視紫質(zhì)(RHO)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)(As,Sb,Bi,Pb,Sn,Na,Cd)多元素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(混標(biāo))(1000μg/ml) 質(zhì)量規(guī)格:BC