產(chǎn)品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,使每個循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
索氏梭狀芽孢桿菌探針法PCR熒光定量試劑盒 | Clostridium sordellii | EY00P8833 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對,定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
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使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
鹽酸甲苯噻TTC瓊脂基礎(chǔ)/三苯四唑瓊脂基礎(chǔ)/氯化三苯四氮瓊脂基礎(chǔ)/紅四氮唑瓊脂基礎(chǔ)/三苯基氯化四氮唑瓊脂基礎(chǔ)/TTC Agar Base Isoluminol
位十二內(nèi)酯TTC營養(yǎng)瓊脂/三苯四唑營養(yǎng)瓊脂/氯化三苯四氮營養(yǎng)瓊脂/紅四氮唑營養(yǎng)瓊脂/三苯基氯化四氮唑營養(yǎng)瓊脂/TCC Nutrient Agar Bis[3,4,6-trichloro-2-(pentyloxycarbonyl)phenyl] Oxalate
特布他林半硫酸鹽TTC*吐溫80營養(yǎng)瓊脂/三苯四唑*吐溫80營養(yǎng)瓊脂/氯化三苯四氮*吐溫80營養(yǎng)瓊脂/紅四氮唑*吐溫80營養(yǎng)瓊脂/三苯基氯化四氮唑*吐溫80營養(yǎng)瓊脂/TTC Lecithin Tween 80 Nutrient Agar Disodium 8-Ami,3,6-naphthalene 3sulfonate Hydrate
4-溴-3-氯苯HC瓊脂基礎(chǔ)/HC Agar Base Coumarin 102
2,3-二氯-6-氟苯甲改良LETHEEN瓊脂基礎(chǔ)/LETHEEN Agar Base Modified Coumarin 314
苯并(k)熒蒽TAT肉湯/胰蛋白胨大豆*聚山梨酸酯瓊脂/*大豆*聚山梨酸酯瓊脂/胰酪胨大豆*聚山梨酸酯瓊脂/TAT Broth Fluorescein Chloride
苯并(b)螢蒽*培養(yǎng)基/Glycine Medium 2',7'-Dichlorofluorescein
R-3-甲基嗎啉鹽酸鹽快速硫化氫試驗瓊脂/H2S Test Medium 2,3-Diaminonaphthalene
*鹽酸鹽DNA酶甲基綠瓊脂基礎(chǔ)/脫氧核糖核酸酶甲基綠瓊脂基礎(chǔ)/Dnase Agar Base With Methyl Green Dimidium Bromide
苯并[g,h,i]芘波爾頓選擇性增菌肉湯/波爾頓肉湯/Bolton Selective Enrichment Broth 7-(Dimethylamino)-4-methylcoumarin
沙丁CCDA基礎(chǔ)/彎曲桿菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)/炭*脫氧膽酸鹽瓊脂基礎(chǔ)/CCDA Base 7-(Dimethylamino)-4-(trifluoromethyl)coumarin
N-叔丁基-2-苯并噻唑次磺酰Campy-Cefex瓊脂基礎(chǔ)/Campy-Cefex Agar Base 7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylic Acid
羥哌LB肉湯/LB Broth Ethyl 6-[4-(Diphenylamino)phenyl]coumarin-3-carboxylate
十一酸甲酯LB瓊脂/LB Agar Uranine K
壬酸甲酯LB-Top Agar Fluorescein Diacetate
索氏梭狀芽孢桿菌探針法PCR熒光定量試劑盒抑瘤素M受體(OSMR)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)甲磺酸* 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,BR1ml(500X)
抑制素βB(INHβB)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)甲磺酸*(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品6次/盒
細(xì)胞色素b-561(CYB561)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鹽酸* 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,BR3×1ml
主要穹窿蛋白(MVP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鹽酸* 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR1ml(500X)
鈣腔蛋白(CALU)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鹽酸* 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品6次/盒
*α(Amyα)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鹽酸*(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR100ml
白介素2受體α(IL2Rα)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)* 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品6次/盒
蕈堿型*受體M3(CHRM3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)* 質(zhì)量規(guī)格:>98%,可溶性鳥苷酸環(huán)化酶激 (sGC)活劑3×1ml