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產(chǎn)品名稱 | 豚鼠皮膚細胞；GP-S1 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63750 |
細胞名稱 豚鼠皮膚細胞；GP-S1
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞系來源于一雌性豚鼠的皮膚組織。2001年由中國科學(xué)院昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1：2傳代；3-4天一次
傳代情況: P3
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法（-）
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產(chǎn)品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生的細胞，以0.25％消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細胞用消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。
Saponarin
CAS No.：20310-89-8
中文名：皂草黃苷
分子式：C27H30O15
尿素 訂購|咨詢 輸出蛋白6(XPO6) 規(guī)格： HPLC≥98%;50mg
訂購|咨詢 輸出蛋白7(XPO7) 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg
角鯊 訂購|咨詢 輸卵管糖蛋白1(OVGP1) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
格列喹 訂購|咨詢 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(TF) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
當(dāng)歸酰異五味子素O 訂購|咨詢 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(TF) 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg
并黃素 訂購|咨詢 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(TF) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
大豆皂苷Ab 訂購|咨詢 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(TF) 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg
香荊芥 訂購|咨詢 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(TF) 規(guī)格： HPLC≥98%;50mg
莨菪 訂購|咨詢 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(TF) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
土荊皮 訂購|咨詢 嗜中性粒細胞胞漿因子2(NCF2) 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg
補骨脂查爾 訂購|咨詢 嗜中性粒細胞胞漿因子2(NCF2) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
異香蘭 訂購|咨詢 嗜中性粒細胞胞漿因子2(NCF2) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
異佛手柑內(nèi)酯 訂購|咨詢 嗜中性粒細胞胞漿因子4(NCF4) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
D甘露糖 訂購|咨詢 嗜乳脂蛋白亞家族1成員A1(BTN1A1) 規(guī)格： HPLC≥98%;100mg
Hederacolchiside A1 訂購|咨詢 嗜鉻蛋白A(CHGA) 規(guī)格： HPLC≥98%;5mg
銀椴苷；椴樹苷 訂購|咨詢 嗜鉻蛋白A(CHGA) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
纖細 訂購|咨詢 嗜鉻蛋白B(CHGB) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
大黃8OβD葡萄糖苷 訂購|咨詢 嗜鉻蛋白B(CHGB) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
KRG2/DDX11 角質(zhì)細胞生長因子調(diào)節(jié)蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml EB, Ethidium bromide stock solution, 10 mg/ml
DSCC1 DSCC1蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml GreenDNA Dye,SYBR Green I
phosphoCARM1(Ser228) 蛋白精N甲基4抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml DGlucose
phosphoPRKAA2(Ser173) 腺苷單活蛋白激酶α2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Imidazole
CAPG2/NCAPG2 染色體相關(guān)蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml L(+)Arabinose
APRIN/PDS5B 雄激素誘導(dǎo)增殖抑制蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Formamide deionized
REC8 減數(shù)分裂重組蛋白家族REC8抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Paraffin oil, light fraction
SA1/Nuclear protein stromal antigen 1 粘結(jié)蛋白SA1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Potassium acetate
辛基三嗪相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:20mg 英文名稱：
氟替卡松酯相關(guān)物質(zhì)混合物標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱：
氟替卡松酯分離度用混合物標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱：
醋雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:10mg 英文名稱：
重組蛋白A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:ea 英文名稱：
卡巴拉汀酒石K異構(gòu)體 規(guī)格:20mg 英文名稱：
群勃龍醋酯系統(tǒng)適用性混合物 規(guī)格:30mg 英文名稱：
依諾肝素溶液用于生物測定標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1ml 英文名稱：
相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱：Amiodarone Related Compound E
尼泊金甲酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:125mg 英文名稱：Methylparaben
豚鼠皮膚細胞；GP-S1腦心浸液瓊脂規(guī)格：250g用途：用于營養(yǎng)苛求細菌的增菌培養(yǎng)
霉菌培養(yǎng)基（含瓊脂和霉素）規(guī)格：250g用途：用于霉菌的分離培養(yǎng)
水解乳蛋白規(guī)格：250g用途：提供細菌生長所需的生長因子
布氏肉湯規(guī)格：布氏肉湯添加劑用途：2ml每支含量
Rustigian氏尿素酶試驗培養(yǎng)基（改良）規(guī)格：250g用途：沙門氏菌的生化鑒定
苔黑酚規(guī)格：5g用途：微生物指示劑
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