公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L2 | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63758 |
細(xì)胞名稱 小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L2
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞系來源于一雄性小耳豬的肺組織。1988年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P2
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 熒光法(-)
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Procyanidin B5
CAS No.:12798-57-1
中文名:原花青素B5
分子式:C30H26O12
磺 訂購|咨詢 解整合素金屬蛋白酶22(ADAM22) 規(guī)格: 100mg
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羅漢果苷IV 訂購|咨詢 羧肽酶A3(CPA3) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支;
Hederacolchiside A1 訂購|咨詢 羧肽酶A3(CPA3) 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg/支
遼東楤木皂苷V 訂購|咨詢 羧肽酶A3(CPA3) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
秦皮素;秦皮亭;白蠟樹內(nèi)酯 訂購|咨詢 羧肽酶A4(CPA4) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
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花旗松素;二氫槲皮素;紫杉葉素;黃杉素 訂購|咨詢 羧肽酶A6(CPA6) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
VPS4a 液泡分選蛋白4抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sodium phosphate, dibasic, anhydrous
APC5 細(xì)胞分裂周期蛋白5抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ferrozine
BRD7 鼻咽癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sodium acetate, trihydrate
BRRN1/CAPH 染色體相關(guān)蛋白H抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Thidiazuron
CDC123/C10orf7 細(xì)胞分裂周期蛋白CDC123抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Iodine
CCDC16/zinc finger protein 830 鋅指蛋白830抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml ADA, Alcohol dehydrogenase
CDC20B 細(xì)胞分裂周期蛋白20B抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Tween80
cb1ip1 周期蛋白B1結(jié)合蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Tween80
妥英標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:250mg 英文名稱:Fosphenytoin Sodium
七氟相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:0.2ml 英文名稱:
卡維地相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:15mg 英文名稱:
標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Cefdinir
牡荊樹提取物標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1.5g 英文名稱:Powdered Chaste Tree Extract
相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
萘標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Naphthalene
度西汀雜質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:10mg 英文名稱:
扁桃標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Mandelic Acid (AS)
羧甲基淀粉標(biāo)準(zhǔn)品(A型) 規(guī)格:400mg 英文名稱:Sodium Starch Glycolate Type A
小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L2YM11瓊脂規(guī)格:250g用途:濾膜法用于霉菌、酵母菌的分離培養(yǎng)
賴氨脫羧酶實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基規(guī)格:BR5g詳情介紹
TSA表面接觸皿(6.5cm)規(guī)格:10個(gè)/包用途:用于環(huán)境、器皿、設(shè)備和表面的無菌檢測(cè)
月桂基硫鹽胰蛋白胨肉湯(LST)顆粒規(guī)格:300ml/袋*10用途:用于大腸菌群,大腸桿菌的測(cè)定(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
波爾頓選擇性增菌肉湯添加劑規(guī)格:2ml/支*5用途:每支添加于225ml中HB0273中
柯氏尿素瓊脂規(guī)格:250g用途:用于細(xì)菌脲酶檢測(cè)
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。