實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學研究，作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹：
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
大鼠肺細胞；WTRL1 | 貼壁生長 | EY-X63756 |
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細胞名稱 大鼠肺細胞；WTRL1
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞系來源于一雄性大白鼠的肺組織。1984年由中國*昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1：2傳代；3-4天一次
傳代情況: P3
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法（-）
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase *儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase*儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將*成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% *和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來，吸除*細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用*細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細胞，盡量去除*細胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
2"-O-Glucosylrutin
CAS No.：55696-55-4
中文名：
分子式：C33H40O21
人絨毛膜*β亞 訂購|咨詢 腺苷合酶(ADSS) 規(guī)格： 240ng/0.5mL/支
醋可的松 訂購|咨詢 腺苷高半胱解酶(AHCY) 規(guī)格： 100mg
豨薟草（腺梗豨薟） 訂購|咨詢 腺苷脫酶(ADA) 規(guī)格： 2g
2基5二(卓雜質(zhì)I) 訂購|咨詢 腺苷裂解酶(ADSL) 規(guī)格： 50mg/支
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金毛耳草(黃毛耳草) 訂購|咨詢 腺苷環(huán)酶2(ADCY2) 規(guī)格： 3g
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瓜子金 訂購|咨詢 腺苷激酶1(AK1) 規(guī)格： 1g
Factor VII light chain *VII 現(xiàn)貨供應 0.2ml 3,5Dinitrosalicylic acid
Myosin VIIa/DFNB2 肌球蛋白7a/常染色體隱性耳聾蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Sodium malonate
Factor X *10抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Sodium phosphate, monobasic, dihydrate
NIR2 膜脂轉(zhuǎn)移蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Malonate
NUSAP1 核仁和紡錘體相關(guān)蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Manganese (II) chloride, tetrahydrate
RAB35 RAS相關(guān)蛋白癌基因Rab35抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Casein
RACGAP1 Rho GTP酶激活蛋白GAP抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Vaseline
phosphoRACGAP1(Ser387) Rho GTP酶激活蛋白GAP抗體 現(xiàn)貨供應 0.1ml Sodium orthovanadate
丁酯標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Butamben
羥酯標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Propylparaben
氟伐他汀標準品 規(guī)格:350mg 英文名稱：Fluvastatin Sodium
勞拉西相關(guān)物質(zhì)C標準品 規(guī)格:25mg 英文名稱：Lorazepam Related Compound C
環(huán)沙星甲酰標準品 規(guī)格:125mg 英文名稱：Ciprofloxacin Formamide
*標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Glimepiride
太林相關(guān)物質(zhì)A標準品 規(guī)格:50mg 英文名稱：
萬拉法新相關(guān)物質(zhì)A標準品 規(guī)格:10mg 英文名稱：
愈創(chuàng)木酚甘標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Guaifenesin
*標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Enrofloxacin
大鼠肺細胞；WTRL1NaCl賴氨脫羧酶肉湯規(guī)格：20支詳情介紹
無菌液體石蠟規(guī)格：1ml*20用途：用于微生物配套試劑
去氧膽鈉規(guī)格：100g用途：用于抑制革蘭氏陽性菌的生長
可溶性淀粉培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于微生物的淀粉水解試驗
Raka-Ray 培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于啤酒中乳菌檢測和分離培養(yǎng)
改良*卵黃多粘菌素瓊脂基礎（MYP）Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base規(guī)格：250g用途：用于蠟樣芽孢桿菌的固體平板計數(shù)無需添加卵黃，高壓滅菌，只加入*即可（GB.SN標準）
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