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產(chǎn)品展示   ProductsATCC細(xì)胞>>轉(zhuǎn)化細(xì)胞>>胚胎氣管組織來源細(xì)胞;CCC-HBE-2
 
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產(chǎn)品名稱:
胚胎氣管組織來源細(xì)胞;CCC-HBE-2
產(chǎn)品型號(hào):
產(chǎn)品報(bào)價(jià):
產(chǎn)品特點(diǎn):
胚胎氣管組織來源細(xì)胞;CCC-HBE-2相關(guān)產(chǎn)品:
5-甲酰-2-噻吩硼酸(含有數(shù)量不等的酸酐)說明書
4'-癸氧基聯(lián)苯-4-羧酸(>98.0%(T))說明書
  胚胎氣管組織來源細(xì)胞;CCC-HBE-2的詳細(xì)資料:

公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

產(chǎn)品名稱

生長特性

貨號(hào)

胚胎氣管組織來源細(xì)胞;CCC-HBE-2

貼壁生長

EY-X63350

細(xì)胞名稱  胚胎氣管組織來源細(xì)胞;CCC-HBE-2
形態(tài)特性:

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 取材自引產(chǎn)的11周男性胚胎組織,該細(xì)胞由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞資源中心建立。

培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)20%FBS

傳代方法: 1:3傳代;3~4天1次。

傳代情況: P4

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 培養(yǎng)法(-)
?
冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠雜交瘤細(xì)胞株;5E4G5形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-FCGR2B Polyclonal Antibody

敘利亞倉鼠腎細(xì)胞系;BHK-21CIAPIN1+形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-MSH4 Polyclonal Antibody

小鼠雜交瘤細(xì)胞株;LB_001形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-MCP-3 Polyclonal Antibody

小鼠雜交瘤細(xì)胞株;JF-IgD形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-GPHN Polyclonal Antibody

小鼠雜交瘤細(xì)胞株;5D2F2形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-PSMD14 Polyclonal Antibody

小鼠雜交瘤細(xì)胞株;WSSV-K1形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-E2F6 Polyclonal Antibody

小鼠雜交瘤細(xì)胞株;WSSV-K2形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-RASGRP3 Polyclonal Antibody

小鼠雜交瘤細(xì)胞株;Ss-IgM形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-SN1G Polyclonal Antibody

胃癌耐藥細(xì)胞株;BGC823/形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-C7 Polyclonal Antibody

小鼠雜交瘤細(xì)胞株;MCM1形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-DENND1B Polyclonal Antibody

肝癌細(xì)胞株;LM3形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-Integrin alpha 3 Polyclonal Antibody

小鼠雜交瘤細(xì)胞株;LCZ4H3形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-CRYAA Polyclonal Antibody

小鼠雜交瘤細(xì)胞株;Sm-IgM形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-FIP1L1 Polyclonal Antibody

小鼠雜交瘤細(xì)胞株;LCZ2A6形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-PRDX1  Polyclonal Antibody

小鼠雜交瘤細(xì)胞株;7G4.3形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-ME1 Polyclonal Antibody

小鼠雜交瘤細(xì)胞株;11-1形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-EMC10 Polyclonal Antibody
胚胎氣管組織來源細(xì)胞;CCC-HBE-2大鼠白介素15(IL-15)ELISA試劑盒GAP-43ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

大鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒GAPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒GastrointestinalcancerMarker-CA199ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒GBMELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

大鼠組織因子(TF)ELISA試劑盒GCAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

大鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒GCELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

大鼠Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA試劑盒GCKELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)ELISA試劑盒GCP-2ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 胚胎氣管組織來 CCC-HBE-2 源細(xì)胞
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021-69985169
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