綜合微生物的培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
（1）前期準(zhǔn)備：（A）滅菌處理；（B）制備Biolite水；（C）檢查設(shè)備和材料；
（2）按比例配制培養(yǎng)材料；
（3）導(dǎo)入曝氣，進(jìn)行繁殖培養(yǎng)；
（4）取液觀察；（a）取液；（b）稀釋菌液；（c）平板培養(yǎng)；
（5）分離并檢測(cè)；
（6）取液儲(chǔ)存；通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng)，培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi)，菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變，且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
環(huán)鏈棒束孢（斜面）說明書 | Isaria cat | EY-J963780 |
資源名稱: 環(huán)鏈棒束孢（斜面）
種屬: Isaria cateniannulata
分離基物: 昆蟲
提供形式: 凍干物
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: CPDA
生長(zhǎng)條件: 26℃
存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過1～2個(gè)月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3～4個(gè)月；②液氮超低溫保存法，將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中，密封于安瓿管內(nèi)，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí)，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng)：
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，不利于放線菌孢子的形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級(jí)種子，把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱為四級(jí)發(fā)酵。
4-氨基硫酚別名: 4-巰基;4-胺并噻吩;對(duì)氨基硫酚;4-氨基硫代酚英文名稱: 4-AminothiophenolCAS: 1193-02-8分子式: C6H7NS
2,6-二甲基-1,4-二氫-3,5-吡二羧二乙酯別名: 2,6-二甲基-1,4-二氫-3,5-吡二羧二乙酯;二氫吡;二乙酯1,4-二氫-2,6-二甲基3,5-嘧二甲;1,4-二氫-2,6-二甲基-3,5-吡羧二乙酯;地羅定英文名稱: Diethyl 2,6-dimethyl-1,4-dihydropyridine-3,5-dicarboxylaCAS: 1149-23-1分子式: C13H19NO4
駢三氮唑（BTA）別名: 駢三氮唑;1，2，3-駢三氮唑，并三氮唑，三唑英文名稱: 1H-BenzotriazoleCAS: 95-14-7分子式: C6H5N3
二乙二醇丁醚別名: 二乙二醇一丁醚,二乙二醇單丁醚，丁基卡別妥爾,二甘醇一丁醚，丁基卡必醇英文名稱: 2-(2-Butoxyethoxy)ethanolCAS: 112-34-5分子式: C8H18O3
二甲基硒英文名稱: DimethylseleniumCAS: 593-79-3分子式: C2H6Se分子量: 109.03
18-冠醚-6有效期: 2年英文名稱: 18-Crown-6CAS: 17455-13-9儲(chǔ)存條件: RT
嘧醇別名: α-環(huán)丙基-α-(4-甲氧基)-5-嘧甲醇;alpha-環(huán)丙基-alpha-(嘧-5-基)-4-甲氧基甲醇;環(huán)丙嘧醇英文名稱: Ancymidol；α-Cyclopropyl-α-(4-methoxyphenyl)-5-pyrimidinemethanolCAS: 12771-68-5分子式: C15H16N2O2
菌別名: 1,4,5,6,7,7-六-二環(huán)[2.2.1]庚-5-烯-2,3-二甲;1,4,5,6,7,7-六二環(huán)(2,2,1)-5-庚烯-2,3-二羧;六內(nèi)次甲基四氫鄰二甲;六橋亞甲基四氫酞;1,4,5,6,7,7-六-5-降烯-2,3-二羧;海特英文名稱: Chlorendic AcidCAS: 115-28-6分子式: C9H4Cl6O4
環(huán)鏈棒束孢（斜面）說明書p-BAD/FITC 熒光素標(biāo)記抗磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子p-BAD抗體IgG載脂蛋白A2抗體2,3,4-三Mouse RSV-IgD (Respiratory syncytial virus IgD) ELISA Kit
BAD(phospho Ser75,Ser99,Ser118) /FITC 熒光素標(biāo)記磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體IgG溶血磷脂?；D(zhuǎn)移酶D抗體間溴苯乙Mouse RSV-IgG (Respiratory syncytial virus IgG) ELISA Kit
Phospho-Bad(Ser136) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、鼠磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體IgG載脂蛋白E3抗體間溴苯乙Mouse RSV-IgM (Respiratory syncytial virus IgM) ELISA Kit
Phospho-Bad(Ser155) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、鼠磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體IgGABI基因家族2抗體間溴苯乙Mouse RBP4 (Retinol Binding Protein 4, Plasma) ELISA Kit
BADH2/FITC 熒光素標(biāo)記BADH2抗體IgG氧化蛋白質(zhì)水解酶1-氨基海因鹽鹽Mouse RNASEA (Ribonuclease A) ELISA Kit
BAFF/CD257/FITC 熒光素標(biāo)記TNF家族B細(xì)胞激活因子抗體IgG鐵調(diào)節(jié)蛋白2抗體1-氨基海因鹽鹽Mouse RNASEH (Ribonuclease H) ELISA Kit
BAFFR/Tnfrsf13c/CD268/FITC 熒光素標(biāo)記B細(xì)胞活化因子受體抗體IgG乙脫氫酶1型抗體2,6-二甲基-4H-4-亞吡喃基二Mouse RNASET2 (Ribonuclease T2) ELISA Kit
Bak/FITC 熒光素標(biāo)記Bcl-2同源拮抗劑Bak抗體IgGAFP4a蛋白抗體5-羥基-1-四氫萘Mouse RPL10 (Ribosomal Protein L10) ELISA Kit
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