提高胱抑素CElisa試劑盒試驗(yàn)質(zhì)量的方法
胱抑素CElisa試劑盒試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。我將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給同行帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
下面分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法
1 選擇試劑 選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣 可能原因: 血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣; 手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法: 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi), 加樣后及時(shí)放入孵箱,加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑,標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育 可能原因: 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*; 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。
解決辦法: 貼封片或加蓋; 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板 可能原因: 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉,采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差,反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。
解決辦法:保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測質(zhì)量。
在胱抑素CElisa試劑盒實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
KLK10 磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體
KLK11 磷酸化生長因子受體結(jié)合蛋白10
KLK14 磷酸化生長激素釋放因子抗體(血清應(yīng)答因子)
KLK3 磷酸化腎上腺素能受體β2抗體
KLK4 磷酸化腎上腺素能受體β2抗體
KLK7 磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體
KLK9 磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體
KLRF1/NKp80 磷酸化神經(jīng)生長相關(guān)蛋白SCG10抗體
KMT6/EZH2 磷酸化神經(jīng)生長相關(guān)蛋白43抗體
K-ras 磷酸化上皮細(xì)胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體
胱抑素CElisa試劑盒